Management of corneal limbal stem cell deficiency with engineering autologous oral mucosal epithelium in rabbit

目的 探讨体外培养的自体组织工程口腔黏膜上皮重建兔角膜上皮的可行性.方法 制作兔角膜缘干细胞缺陷模型32只,实验组Ⅰ～Ⅲ以自体口腔黏膜上皮细胞为种子细胞制作组织工程上皮,移植到实验组模型兔角膜表面,分别观察2周、1个月、3个月,对照组移植空白载体膜,观察3个月.术后裂隙灯显微镜下观察,以角膜新生血管、混浊度及上皮染色评分评价移植效果.用组织病理、免疫组织化学和印迹细胞技术评价角膜上皮重建的可能性.结果 模型兔角膜混浊,有大量新生血管和杯状细胞.实验组移植后角膜透明,印迹细胞检查PAS(-).实验组与对照组术后角膜总评分差异有统计学意义(P=0.000),p63表达阳性,角膜上皮的组织特点及角蛋白的表达与正常角膜上皮相似.结论 组织工程口腔黏膜上皮在角膜基质微环境的诱导下可分化为角膜样上皮细胞,有重建角膜上皮的作用。