胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤的干预效应

目的:观察胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤干预的影响.方法:实验于2005-05/2005-07在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成.选用51只健康SD大鼠,以随机数字表法选出36只造模,采用皮下注射牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎)模型,另15只作为正常对照组,注射等量生理盐水.成模大鼠30只以随机数字表法分为模型组和痹肿消汤组,各15只.痹肿消汤组于初次免疫7 d后开始灌服痹肿消汤(痹肿消汤由白花蛇舌草、肿节风、苡米、络石藤、丹参、骨碎补等15味中药组成,体表面积比换算关系,大鼠用药为70 kg成人临床用药3倍,药材从中南大学湘雅医院中药房一次性选购,两次水煎取药液备用),相当于生药62.1g/(kg·d),每只约1.5 mL,2次/d灌服;模型组与正常组同体积生理盐水.观察大鼠一般情况,并定期对其进行关节炎指数评分.按0～4级进行评分,0分:无关节炎;1分:有红色斑点后轻度肿胀;2分:关节部位中度肿胀;3分:关节严重肿胀;4分:关节严重肿胀且不能负重.采用免疫印迹法(Western blot)检测正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠在不同时间点滑膜组织醛缩酶A的表达,运用ImageTool 3.0灰度扫描软件对结果进行半定量分析.结果:纳入实验的51只大鼠,造模不成功被淘汰6只,最终痹肿消汤组15只、模型组15只、对照组15只,共45只大鼠进入结果分析.①各组大鼠关节炎指数比较:模型组大鼠关节炎指数于免疫后25 d左右达到高峰,30 d后呈下降趋势;痹肿消汤组大鼠亦于25 d左右达高峰,但较模型组低.②各组大鼠滑膜组织醛缩酶A的表达:模型组醛缩酶A表达在25,35,45 d递增(P＜0.05～0.01),且明显高于同时间正常组及痹肿消汤组(P＜0.05～0.01);痹肿消汤组醛缩酶A表达在各时间点明显低于同时间模型组及正常组(P＜0.05,P＜0.005,P＜0.001),在25,35 d和45 d表达水平呈递减趋势(P＜0.05,0.01).结论:类风湿关节炎关节病变过程中醛缩酶A表达增加,且随免疫时间延长而逐渐上调.痹肿消汤能下调关节炎大鼠滑膜醛缩酶A表达,这可能是其阻抑类风湿关节炎骨质侵蚀的重要机制之一.