两步酶分层消化法用于大鼠视网膜色素上皮细胞的培养
Chinese Ophthalmic Research(2006)
Abstract
目的 探索体外分离、培养大鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞的方法,建立其体外培养模式.方法 采用两步酶分层消化法分离获取大鼠RPE细胞,F12培养液培养;生长曲线、细胞分裂时间等指标观察细胞生存活力及增生状态;光镜、免疫组织化学法形态学鉴别及细胞鉴定,电镜观察超微结构.结果 收获的大鼠RPE细胞纯度高,量多,体外生长旺盛,达到融合的时间较短.原代细胞呈多角形,含大量色素;传代细胞呈梭形.电镜显示胞浆内含黑色素颗粒及各种细胞器.结论 两步酶分层消化法是分离培养大鼠RPE细胞的理想方法,培养的细胞可用于RPE的体外实验研究.
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Key words
Cell culture,Rat,Retinal pigment epithelium,Two steps enzyme gradation digestion
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