穴位埋药线对癫痫持续状态大鼠海马神经元凋亡的影响

目的:观察穴位埋药线对癫痫持续状态大鼠海马神经元形态和神经元细胞凋亡的影响,并分析其发生机制.方法:实验于2002-11-18/24在广州中医药大学针灸推拿学院针灸治疗学实验室完成.①选用健康纯系雄性SD大鼠40只,1.5～2月龄.喂养1周后按随机抽签法将大鼠分为5组:空白组、模型组、西药组、常规针刺组、穴位埋药线组,每组8只.模型组、西药组、常规针刺组、穴位埋药线组大鼠均腹腔注射青毒素4×106IU/kg造成癫痫持续状态模型;空白组腹腔注射与造模组同等剂量的温生理盐水.以大鼠出现行为和皮质脑电图改变判断造模是否成功.具体方法如下:穴位埋药线组:在造模前3 d埋线,选取大鼠大椎、心俞透膈俞(双)穴.用医用羊肠线浸泡于安定液24 h后,将药线埋植在穴位的皮下组织或肌层内.常规针刺组:选大椎、心俞透膈俞(双)穴,用美容针,平补平泻,30 min/次,1次/d,在造模前5 d开始治疗,致痫当天也予治疗.西药组:致痫后即予腹腔注射0.25 mg/kg苯妥英钠.空白组和模型组不予治疗.②所有动物均在致痫24 h后,取脑,制成石蜡切片.以苏木精-伊红染色光镜下观察癫痫持续状态后大鼠海马神经元形态学改变;以原位细胞凋亡检测法检测穴位埋药线对癫痫持续状态后大鼠海马神经元DNA片段化的影响,每张切片计数3个不同视野(×400)内的阳性细胞数,取平均数作为细胞凋亡指数.③计量资料差异比较采用t检验.结果:大鼠40只均进入结果分析.①海马神经元细胞形态:空白组大鼠海马神经元细胞形态正常.致痫后24 h,模型组、西药组、常规针刺组和穴位埋药线组的大鼠海马神经元细胞均可见不同程度的凋亡表现.②神经元细胞凋亡情况:模型组细胞凋亡指数明显高于空白组[(85.26±22.76),(11.50±4.20)个,P＜0.01];穴位埋药线组、西药组与常规针刺组细胞凋亡指数低于模型组[(25.48±9.70),(32.00±5.05),(55.56±10.11)个],但只有穴位埋药线组与模型组差异明显(P＜0.01),最接近空白组;3个治疗组细胞凋亡指数相近.结论:穴位埋药线疗法可能通过抑制神经元细胞凋亡起到治疗癫痫的作用.