人TACI-linker-BR3双受体融合基因真核表达载体构建及其在COS-7细胞中的表达
Academic Journal of Second Military Medical University（2006）
Abstract
目的:构建人双受体融合基因真核表达载体--pcDNA3.1(+)-TACI-linker-BR3-IgGFc,观察其在COS-7细胞中的表达.方法:应用基因工程技术构建重组载体,脂质体转染COS-7细胞,通过Western印迹、ELISA以及免疫组化方法,检测目的蛋白的表达及其与BAFF、APRIL蛋白相互作用情况.结果:融合基因在瞬时转染的真核细胞中获得表达,并分泌至上清,转染效率能达到48%,融合蛋白能与BAFF、APRIL蛋白有效结合而且融合蛋白中分子标签IgGFc未影响双受体融合蛋白的结构及其生物学活性.结论:人TACI-linker-BR3双受体基因与IgGFc融合基因载体构建成功,表达的融合蛋白具有生物学活性,为进一步探讨SLE等自身免疫疾病的发病机制和生物学治疗方法奠定了基础.
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Key words
APRIL,BAFF,BR3,Eukaryotic expression,Fusion protein,TACI
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