EB病毒诱发人B细胞淋巴瘤的分子病理特性

EB病毒(EBV, Epstein-Barr virus)与人类多种肿瘤有关, 尤其是与鼻咽癌和淋巴瘤的关系密切. 为此研究了EB病毒在huPBL/SCID嵌合体小鼠体内诱发人B细胞淋巴瘤的分子特性及肿瘤发生机制. 从健康成人外周血分离出淋巴细胞, 将之移植到SCID小鼠腹腔内, 实验感染EBV, 观察肿瘤的形成; 采用单向免疫扩散法连续监测小鼠血清中人IgG的含量. 分别用PCR方法检测肿瘤组织中是否存在人Alu序列, 原位杂交检测肿瘤组织中EB病毒小RNA 分子EBER-1; 免疫组织化学方法检测人白细胞分化抗原(CD45、CD20、CD45RO、CD3), 病毒基因(LMP1、EBNA2、BZLF1)的表达, 以及细胞瘤基因蛋白(p53、C-myc、Bcl-2、Bax)在诱发肿瘤中的表达情况. 结果发现, 实验中34只感染EBV 的huPBL/SCID小鼠有24只诱发出肿瘤, 根据病理形态学特征、Alu-PCR和免疫标志均证实诱发瘤是人源性B淋巴细胞肿瘤. 原位分子杂交显示肿瘤细胞核内存在EBER-1, 少数瘤细胞表达EB病毒BZLF1蛋白阳性, 部分瘤细胞表达LMP1和EBNA2蛋白阳性. 连续监测12只huPBL/SCID小鼠血清中人IgG含量, 发现IgG水平随诱瘤时间延长和肿瘤生长有逐渐增高趋势. 免疫组化显示诱发的24例淋巴瘤组织p53、C-myc、Bcl-2和Bax蛋白表达阳性率分别为83.33%、100%、95.83%、91.67%. 结果提示, 诱发性淋巴瘤的分子病变包括EB病毒感染和致瘤基因表达、并诱导宿主细胞瘤基因过表达; 监测huPBL/SCID小鼠血清中人IgG升高水平可作为该动物模型预测肿瘤发生的指标.