DCN基因转染对大鼠肾系膜细胞生长及表型改变的影响

目的通过观察转染DCN基因的大鼠系膜细胞(MsC)生长及其一些表型的改变,为其用作细胞载体回输入大鼠肾病模型体内进行基因治疗奠定实验基础.方法采用MTT比色法和流式细胞仪技术,检测该MsC株生长情况;Northern blot和Western blot法检测其TGF-β1 mRNA、ColⅣmRNA和TGF-β1蛋白表达水平;半定量RT-PCR法检测其TIMP-2 mRNA表达的改变.结果与未转染MsC相比,转染DCN基因的MsC株的生长受到明显抑制(5 d时P＜0.05,6 d时P＜0.01);G0/G1期比例增加,S期比例降低,提示其生长缓慢;TGF-β1和ColⅣmRNA表达明显降低,TGF-β1蛋白分泌减少;TIMP-2 mRNA表达明显下调.结论转染DCN基因的MsC可被用作载体开展对大鼠系膜增生性肾炎的实验治疗.