低氧提高肿瘤细胞反义 VEGF165基因表达
Acta Biochimica et Biophysica Sinica（2002）
Abstract
为了探讨反义VEGF165基因对食管癌的抑制作用, 并初步探讨利用肿瘤低氧微环境改善基因治疗的效果, 采用PCR技术和DNA重组技术构建了含低氧反应元件的真核表达载体, 并用此载体构建了含荧光素酶报告基因和反义VEGF165基因的重组载体. 用脂质体将重组载体导入食管癌细胞, 体外用化学发光光度计测定低氧对报告基因表达的调节和ELISA法间接测定低氧对反义VEGF基因表达的调节作用. 体内利用裸鼠皮下移植实验研究低氧对反义VEGF165基因抑瘤作用的影响. 体外实验表明, 用带低氧反应元件的重组真核表达载体转染食管癌细胞, 在低氧培养下可以使报告基因的表达提高3 780%, 并可以显著提高反义VEGF165基因的表达, 体内用带低氧反应元件的载体将反义VEGF165基因导入食管癌细胞中, 其抑瘤效果显著优于不含该元件的载体, 抑瘤率分别为71.7%和56.1%. 反义VEGF165基因能显著抑制食管癌的生长; 利用肿瘤低氧可以实现治疗基因的自主调节, 改善基因治疗的效果.
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Key words
Angiogenesis,Esophageal cancer,Hypoxia,VEGF
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