阴沟肠杆菌Amp C酶的特性研究

本文对阴沟肠杆菌Amp C酶进行了以下5个方面研究,其内容和结果分别为:(1)联合药敏实验:用平皿二倍稀释法研究第四代头孢菌素头孢吡肟,第三代头孢菌素头孢他啶、头孢噻肟、头孢呋辛与β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦联合对34株头孢他啶耐药菌,6株头孢他啶中敏菌及15株头孢他啶敏感菌的体外抗菌活性.结果表明舒巴坦使头孢他啶对32.7%(18/55)的阴沟肠杆菌的抗菌作用有明显抗菌增效作用.96.4%(53/55)的阴沟肠杆菌对第四代头孢菌素头孢吡肟敏感.(2)酶稳定性实验:紫外测定法测定4株标准菌和6株临床分离菌产生的Amp C酶对β-内酰胺类抗生素的水解率,结果表明阴沟肠杆菌产生的β-内酰胺酶对第一代头孢菌素头孢唑林、头孢氨苄,第二代头孢菌素头孢克洛,第三代头孢菌素头孢哌酮及青霉素、氨苄西林、哌拉西林的水解率高.对第二代头孢菌素头孢呋辛、第三代头孢菌素头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶,第四代头孢菌素头孢吡肟以及亚胺培南、美洛培南和单环类β-内酰胺抗生素氨曲南的水解率较低.β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦对4株标准产酶菌及6株临床分离菌产生的β-内酰胺酶均无抑制作用,而三唑巴坦则对上述酶有明显的抑制作用.(3)Amp C酶分子量测定:用SDS-PAGE测定酶的分子量,结果表明Amp C酶的分子量约为39.6kD.(4)Amp C酶等电点测定:用等电聚焦仪测定Amp C酶的等电点,结果表明EB131和E265A标准菌产生的酶的等电点约为8.65.4株临床分离菌所产生的酶的等电点在8.65～9.30之间.(5)amp C基因扩增:用PCR对55株阴沟肠杆菌进行amp C结构基因的PCR扩增,结果表明有51株PCR扩增阳性.