编码人分化抗原5C5全长cDNA的克隆及功能初探

目的 编码5C5分化抗原全长cDNA的克隆及功能探索.方法 构建人活化B细胞株3D5细胞的λgt11 cDNA文库,以核苷酸杂交法从cDNA文库中筛选阳性克隆,作核苷酸序列分析,编码蛋白质氨基酸序列的亲疏水分析,Northern blot测5C5 mRNA转录本长度,用RT-PCR检测5C5 mRNA在不同细胞株的表达,观察单抗5C5-G1对3D5细胞增殖的影响.结果 从人活化B细胞株3D5的λgt11 cDNA文库筛选到长905bp的5C5-1 cDNA及754bp的5C5-2 cDNA.5C5-1 cDNA序列内有1个开放阅读框架(19～537bp),编码179个aa的蛋白质.此蛋白质内有一穿膜螺旋结构(94～114aa),其N端在胞内.5C5-2 cDNA从163到459为开放阅读框架,编码99个aa的蛋白质.从Northern blot见0.9kb左右和0.7kb左右2条杂交带.由RT-PCR见5C5 mRNA在3D5细胞强表达,在Daudi细胞表达次之,在Jurkat细胞表达最弱.单抗5C5-G1有增强cpBCGF诱导3D5细胞增殖的作用.结论 长905bp的5C5-1 cDNA为1个全长cDNA.编码1个膜蛋白,可能参与3D5细胞的增殖反应.