高效液相色谱法同时测定四逆汤中6个指标性成分

目的 采用高效液相色谱法同时测定四逆汤中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰乌头次碱、异甘草素、甘草酸和6-姜酚6个成分的含量.方法 采用Waters Terra C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,3.5 μm),检测波长:除异甘草素外的5种成分采用235 nm检测,异甘草素采用370 nm的检测波长；流动相为A:95％乙腈和5％水的混合溶液(0.1％甲酸+5 mmol/L醋酸铵),B:0.1％甲酸水溶液(5 mmol/L醋酸铵),梯度洗脱,A相随时间的变化:25％～35％ (0～5 min),35％～50％(5～15 min),50％～85％(15～20 min)；流速0.5 mL/mim柱温25℃；进样量5 μL.四逆汤按照传统煎煮方法提取.结果 6个指标性成分苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰乌头次碱、异甘草素、甘草酸、6-姜酚分别在5.600～112.0、6.560～131.2、6.130～122.6、4.590～91.8、31.00～620.0、4.920～98.4 μg/mL范围内线性良好(r＞0.999 0),在15min内实现完全分离.方法学考察表明,日内及日间精密度RSD＜5％,加样回收率(n=6)分别为101.07％(RSD=1.3％)、98.72％ (RSD=1.1％)、101.57％ (RSD=1.8％)、101.71％ (RSD=3.6％)、102.12％ (RSD=2.3％)、99.58％ (RSD=3.8％).结论 该方法简便、准确、实用性强,可用于四逆汤中6个指标性成分的含量测定.