乙醇脱氢酶共存固相电致化学发光生物传感器对p53基因的检测

构建乙醇脱氢酶(ADH)共存固相电致化学发光(ECL)生物传感器,对p53基因进行检测.多壁碳纳米管、Ru(bpy)2+3及吡咯膜复合物(MWNTs-Ru(bpy)2+3-PPy)修饰电极可有效固载ssDNA,ssDNA与纳米金胶(AuNPs)标记的p53基因杂交,AuNPs进而吸附ADH.将ADH参与的专一性的酶促反应与高灵敏的固相ECL技术偶联,建立检测p53基因的方法.该方法对p53野生型序列(wtp53)的检测限为0.1 pmol/L,对p53突变序列(mtp53)和wtp53的区分度达57.1％.应用该方法,MGC-803胃癌细胞溶解产物中的wtp53产生信号强度仅为正常GES-1胃粘膜细胞溶解产物中wtp53产生信号强度的61.8％,浓度降低约59倍.该方法与传统的ELISA法具有较好的互补性,其在癌症早期诊断、临床治疗过程监控等方面具有潜在的应用前景.