Ad-NLS-RARα对HL-60细胞增殖及ATRA诱导的HL-60细胞分化的影响及其机制

目的 将已构建验证成功的重组腺病毒Ad-NLS-RARα感染至HL-60细胞中,探讨其对HL-60细胞增殖及全反式维甲酸(ATRA)诱导的HL-60细胞分化的影响及机制.方法 将验证正确的腺病毒经Protamine sulfate辅助感染HL-60细胞,检测感染效率,用RT-PCR和Western blot检测目的基因在HL-60细胞中的表达情况.MTT法检测细胞增殖情况.病毒感染HL-60细胞24 h后,用2.5 μmol/L ATRA处理,流式细胞术(FCM)检测细胞表面分化抗原CD11b的表达.RT-PCR和Western blot检测C-MYC基因在mRNA和蛋白水平的表达.结果 在Protamine sulfate辅助感染作用下,重组腺病毒Ad-NLS-RARα和阴性对照腺病毒Ad-KZ对HL-60细胞的感染效率可达70％～80％.NLS-RARα基因的RT-PCR和Western blot结果显示,感染了重组腺病毒AdNLS-RARα的HL-60细胞的NLS-RARα基因的mRNA及蛋白表达水平明显增高(P＜0.05).MTT法检测表明感染了重组腺病毒Ad-NLS-RARα的细胞增殖能力增高(P＜0.05).FCM检测结果显示,经ATRA处理后,感染Ad-NLS-RARα重组腺病毒的HL-60细胞,CD11b表达较阴性对照组和未感染组下调(P＜0.05).C-MYC基因的RT-PCR和Western blot检测结果表明,经ATRA处理后,感染Ad-NLS-RARα重组腺病毒的细胞C-MYC基因的mRNA和蛋白水平均高于其他两组(P＜0.05).结论 重组腺病毒Ad-NLS-RARα可以促进HL-60细胞的增殖,并通过上调C-MYC基因的表达,抑制ATRA诱导的HL-60细胞分化.