细胞毒力因子CagA上调人胃黏膜上皮GES-1细胞TET2蛋白的表达

目的:探讨幽门螺旋杆菌细胞毒素相关基因A(cytotoxin associated gene A,CagA)与胃黏膜中TET2(ten-eleven translocation 2)蛋白表达的关系,以及TET2在CagA致癌过程中可能的作用.方法:Real-time PCR检测人胃黏膜上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株MGC-803中TET2 mRNA的表达水平,细胞免疫染色法检测TET2蛋白的细胞定位及表达.将pEGFP-CagA通过脂质体介导转染GES-1细胞,用200 μmol/L H2O2处理GES-1细胞建立氧化应激模型,流式细胞仪检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)和细胞周期的变化.结果:TET2 mRNA在GES-1细胞的表达水平低于胃癌MGC-803细胞(1.00±0.08 vs 1.68 ±0.07,P＜0.05),TET2蛋白在GES-1细胞表达水平低于胃癌MGC-803细胞(8.09 ±3.57 vs 14.60±2.31,P＜0.05).与阴性对照组pEGFP-N1相比,pEGFP-CagA转染组GES-1细胞中TET2 mRNA表达水平升高(1.00 ±0.04 vs 0.06 ±0.00,P＜0.05),TET2蛋白表达水平也升高(16.45 ±4.40 vs 10.82 ±3.39,P＜0.05),ROS积累水平升高(18.39 ±4.52 vs 15.31 ±4.40,P＜0.05),细胞周期检测出现明显的凋亡峰.氧化应激(H2O2处理)模型中GES-1细胞与空白对照GES-1细胞相比,TET2 mRNA水平升高(1.44 ±0.02 vs 1.00 ±0.04,P＜0.05),TET2蛋白表达水平增高(15.72±4.52vs 11.74 ±4.34,P＜0.05).结论:幽门螺旋杆菌毒力因子CagA可诱导GES-1细胞ROS增高和细胞周期的失衡,氧化应激可以诱导TET2表达上调,TET2可能参与CagA的致癌过程.