犬组织匀浆中乌头碱的高效液相色谱-质谱测定法及体外稳定性研究

目的 建立了犬组织匀浆中有毒生物碱乌头碱的高效液相色谱-质谱测定法,并应用该方法考察了乌头碱在犬主要组织匀浆中的代谢稳定性.方法 色谱柱为C18柱,流动相为含有5 mmol/L甲酸铵和0.2％甲酸的乙腈和水,梯度洗脱.三重四级杆串联质谱配备电喷雾电离源(ESI),正离子模式下以选择离子监测进行检测.乌头碱分别与犬的肝、小肠、胃和肾的组织匀浆温孵,温孵后不同时间点取出,加入内标西酞普兰,乙腈沉淀后取上清液直接进样测定.结果 乌头碱浓度在5～500 ng/ml峰面积和内标的比值与浓度呈良好的线性关系；方法的回收率为85.73％～92.12％,其日内、日间的RSD值分别为5.32％ ～ 8.95％和5.45％～8.86％.体外孵育2h后,在犬肝、小肠匀浆中有约20％的乌头碱进行了代谢转化,其t1/2分别为460.6和521.3 min.但在胃和肾中几乎无变化.结论 研究提示犬体内的乌头碱主要在小肠、肝脏中代谢转化,但其代谢和清除较慢.