微小RNA-451在乳腺癌细胞中的表达及其与耐药的关系

目的:研究人类微小RNA-451 (Homo sapiens microRNA-451,hsa-miR-451)在乳腺癌细胞中的表达及其与多柔比星(adriamycin,ADM)耐药的关系.方法:用实时荧光定量PCR一步法检测乳腺癌亲本细胞MCF-7和耐ADM细胞MCF-7/ADM中hsa-miR-451的表达；利用脂质体分别将成熟miR-451的模拟物(mimics)及阴性对照转染MCF-7/ADM细胞,然后采用实时荧光定量PCR法检测细胞中多药耐药基因1(multi-drug resistance gene 1,MDR1)mRNA的表达,蛋白质印迹法检测细胞中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达,MTT法检测不同浓度ADM作用下的细胞增殖情况.结果:miR-451在MCF-7/ADM耐药细胞中低表达,与亲本细胞MCF-7相比明显降低(P＜0.05).MCF-7/ADM细胞转染miR-451 mimics后,MDR1 mRNA和P-gp蛋白的相对表达量比阴性对照转染组均明显下降(P＜0.05)；而miR-451 mimics转染组细胞对ADM的敏感性增加,其半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC50)值与阴性对照转染组细胞相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:在乳腺癌耐药细胞MCF-7/ADM中miR-451异常低表达,可能通过作用于MDR1/P-gp参与乳腺癌细胞耐药的发生和发展.