半巢式甲基化特异性PCR在急性淋巴细胞白血病患者p15基因甲基化检测中的应用

目的 探讨半巢式甲基化特异性PCR( hn-MSP)的特性并了解p15基因甲基化和缺失在急性淋巴细胞白血病(ALL)发病中可能起到的作用.方法 运用hn-MSP方法和基因组硫化修饰PCR( BSP)后直接测序方法,分析在25例初诊或复发不同阶段ALL患者以及部分恶性血液病细胞株中p15基因的甲基化和缺失状态,以10名健康者或非恶性血液病患者为对照组.以Molt-4细胞株为阳性对照,以对照组单个核细胞为阴性对照,分析hn-MSP方法的敏感性和特异性.结果 hn-MSP产物克隆测序结果与BSP结果一致,hn-MSP检测p15基因甲基化敏感性可达到1×10-5.25例ALL患者p15基因甲基化发生率为68.0％(17例)；25例ALL患者中3例p15基因外显子1缺失.对照组p15基因无甲基化或缺失.结论 p15基因甲基化状态在ALL患者中有较高的检出率,hn-MSP对分析p15基因甲基化状态具有较高的特异性和敏感性.