肿瘤坏死因子α基因沉默对无菌性炎症的抑制作用
Journal of Shanghai Jiaotong University (Medical Science)(2012)
Abstract
目的 研究局部应用靶向肿瘤坏死因子α(TNF-α)的小干扰RNA(siRNA)对磨损颗粒诱导的无菌性炎症的抑制作用.方法 构建重组慢病毒载体,设计靶向TNF-α的siRNA序列和错配序列各1条.建立小鼠气囊模型,气囊内注射聚甲基丙烯酸甲酯颗粒诱导无菌性炎症反应.将建模后的小鼠随机分为3组,每组12只,分别在小鼠气囊内注入TNF-α siRNA(TNF-α组)、错配siRNA(MS组)和PBS(对照组);慢病毒转染后第14和28天每组各处死6只小鼠,取出气囊组织.采用Real-Time PCR法检测气囊中TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA的表达;ELISA法检测TNF-α蛋白的含量;组织学检测气囊壁厚度和炎症细胞计数;活体荧光成像定量分析绿色荧光蛋白(GFP)荧光的强度和分布.结果 慢病毒介导TNF-α siRNA的局部应用显著降低了TNF-α组中TNF-α、IL-1和IL-6 mRNA的表达(P<0.01),也降低了TNF-α蛋白的含量(P<0.01);TNF-α组炎症反应(囊壁厚度和细胞浸润)显著减弱(P<0.05或P<0.01).活体荧光成像显示,GFP的表达局限于气囊局部,TNF-α组和MS组荧光量比对照组升高5倍左右.结论 局部应用TNF-α siRNA可有效抑制磨损颗粒诱导的无菌性炎症,且无全身性不良作用.
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Key words
Aseptic inflammation,Lentivirus,Small interfering RNA,Tumor necrosis factor-α
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