GINS2基因siRNA真核表达质粒的构建及其对NB4细胞凋亡的影响

目的 构建GINS2基因siRNA真核表达质粒,并检测其对NB4细胞凋亡的影响.方法 人工合成针对GINS2基因的4组siRNA干扰序列和1组无同源性的序列,测序鉴定后转染低传代人早幼粒细胞系NB4细胞,经G418筛选后,通过QRT-PCR、Western blot检测重组质粒对NB4细胞中GINS2基因mRNA转录水平和蛋白表达水平的影响；流式细胞术检测NB4细胞的凋亡情况.结果 5组重组质粒经测序证明构建正确,4组干扰质粒转染NB4细胞后,细胞中GINS2基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平均有所降低,其中干扰组1基因干扰率达50％,蛋白相对表达量为56％；干扰组1细胞凋亡率为32.54％,较正常对照组和NC组明显上升(P＜0.01).结论 成功构建了GINS2基因siRNA真核表达质粒,抑制GINS2基因的表达可促进NB4细胞的凋亡,为进一步研究GINS2基因在白血病中的作用奠定了基础.