藁本内酯对大鼠慢性缺血性脑白质损伤的保护作用

目的采用双侧颈总动脉结扎法(2VO)建立慢性脑缺血性模型,研究藁本内酯(LIG)对脑白质损伤的保护作用。方法 48只雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、模型组、LIG40和10 mg·kg-1.d-1),2VO建立大鼠脑血流低灌的缺血性模型,术后1 h灌胃给药。(1)伊文思蓝(EB)扩散试验:每组6只动物,连续给药3 d,末次药后1 h,静脉注射4%伊文思蓝(1 ml/只),1 h后麻醉动物,PBS行心脏快速灌流后开颅取脑,以液氮速冻,制备连续冠状冰冻切片(20μm),于荧光显微镜G激发状态下观察,NIH Image1.6图像分析软件分析EB渗漏,以比较各组血脑屏障通透性的变化;(2)对慢性缺血性脑白质损伤的影响:每组6只动物,连续给药14d,末次药后1 h,麻醉动物取脑、常规固定,用Klüver-Barrer(KB)染色观察胼胝体、内囊、尾壳核髓鞘损伤程度,免疫组织化学染色观察胼胝体区域髓鞘碱性磷脂蛋白(MBP)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的蛋白表达,Image-Pro-Plus 5.0图像分析软件计算结果。结果与假手术组比较,模型组脑内的EB渗出量显著增加(P<0.01);KB染色显示胼胝体、内囊、尾壳核白质组织出现明显空洞和神经纤维脱失,胼胝体MBP表达显著减少;胼胝体GFAP及MMP-2表达显著增加(P<0.01);而LIG剂量依赖性显著减少2VO大鼠脑内的EB渗出量、改善髓鞘脱失和与空泡形成等白质疏松程度、抑制胼胝体GFAP和MMP-2的蛋白表达(P<0.05)。结论 LIG可明显减轻慢性缺血性脑白质损伤,其机制可能与LIG可改善缺血急性期血脑屏障功能、抑制胶质细胞活化以及基质金属蛋白酶活性有关。