恒河猴经口重复给S-001 13周的毒性及毒代动力学

目的通过猴连续13周灌胃一类新药S-001的毒物代谢动力学研究,以了解原型S-001及其代谢产物S-002在动物体内的系统高暴露量下的毒性作用,确定无毒反应的剂量及相关的血药浓度,为描述暴露与给药剂量和给药期限的关系提供依据。方法实验动物恒河猴,连续13周灌胃S-001,1次/天,剂量为10,20和40 mg·kg-1。应用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)测定首次和13周给药后猴血浆中S-001和S-002的浓度,分析并对比各剂量组之间两者的暴露水平(Cmax和AUC)、消除半衰期(t1/2)和体内平均驻留时间(MRT)等毒代动力学参数。结果方法学验证结果表明LC-MS/MS检测S-001和S-002特异性好,在2～1000 ng.ml-1范围内均呈现良好线性关系,日内日间精密度<10%,回收率高于97%,基质效应小于20%,血浆样品在-4℃放置4 h、-20℃储存3 d和样品萃取液室温放置24 h均稳定。猴首次灌胃10,20和40 mg·kg-1三个剂量药物S-001后S-001的AUC比值为1∶2.43∶4.37(低∶中∶高),S-002的AUC比值为1∶2.63∶5.01(低∶中∶高),两者的血浆暴露随剂量增加而提高,高剂量组Cmax没有呈比例增加,并且消除半衰期有延长的趋势,表明高剂量吸收和消除均出现了饱和趋势;猴连续13周灌胃药物三个剂量后S-001的AUC比值为1∶3.46∶7.37(低∶中∶高),S-002的AUC比值为1∶2.69∶6.97(低∶中∶高),两者的血浆暴露随剂量增加而提高,与首次给药相比,S-001的AUC和24 h血药浓度均有升高的趋势(P>0.5),而S-002的AUC和24 h血药浓度均有降低的趋势,表明猴连续13周给药后S-001有蓄积的倾向,S-002的代谢转化率有降低的趋势;血液生化检验发现可引起动物肮脏和心肌可恢复性损伤,病理发现药物可引起胸腺和肝脏等器官毒性损伤。结论 S-001和S-002的毒代参数分析表明,高剂量组猴在首次给药后原型及其代谢产物在动物体内吸收和消除均出现了饱和趋势,13周反复给药后原型有蓄积倾向,并可造成肝药酶的抑制。高剂量组3只动物体内S-001和S-002在体内的暴露量和消除半衰期明显高于同组其他动物,是导致这3只动物在实验期间相继死亡的物质基础。