灵芝多糖、水飞蓟素改善不同程度肾小球内皮细胞氧化应激损伤的Sirt1调节机制研究

目的对照Sirt1激动剂白藜芦醇(Res),研究灵芝多糖(GLPs)、水飞蓟素(Silymarin)对肾小球内皮细胞不同程度氧化损伤的保护作用及Sirt1影响。方法 80μmol/L过氧化氢(H2O2)损伤时,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)测定各组细胞Sirt1基因水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定各组蛋白表达水平;95μmol/L H2O2损伤时,慢病毒颗粒转导Sirt1 SHRNA后MTT法测定各组细胞活力。结果 80μmol/L H2O2损伤下,各组Sirt1mRNA水平为水飞蓟素组=白藜芦醇组=模型对照组>灵芝多糖组=正常对照组,Sirt1蛋白表达为模型对照组>白藜芦醇组>灵芝多糖组=水飞蓟素组=正常对照组;H2O2浓度95μmol/L时,各组细胞活力依次为:灵芝多糖组>水飞蓟素组>白藜芦醇组=模型对照组。结论一定程度氧化损伤下,机体自我修复作用可能与主动上调Sirt1表达有关;氧化损伤时细胞存活率与Sirt1表达非线性关系,Sirt1mRNA和蛋白表达水平也不尽一致;灵芝多糖、水飞蓟素、白藜芦醇对Sirt1的影响不同。