IgG抗-A/B ELISA检测方法的初探

目的 建立1种IgG抗-A/B ELISA检测方法.方法 将唾液血型物质以磷酸盐缓冲液包被酶标板,10%脱脂奶粉磷酸盐缓冲液37℃封闭1 h,洗涤后加入系列稀释的待检血清,37℃孵育30 min,洗涤并加入酶标记羊抗人IgG,37℃孵育30 min,洗涤,TMB显色,2 mol/L H2SO4溶液终止反应,酶标仪读取A450/A630,以P/N≥2.1判为抗体阳性,将抗体阳性的最高稀释度作为血清IgG抗-A/B效价.结果 阴性对照血清与反应系统无交叉反应;检测IgG抗-A批内变异2.3%～7.7%,批间变异5.9%～8.1%,IgG抗-B批内变异3.7%～5%,批间变异6.5%～8.7%.ELISA法检测30名孕妇IgG抗-A效价阳性率为26.67%,抗体效价检测结果与抗球蛋白法符合率73.33%;IgG抗-B效价的阳性率和符合率分别为23.33%、76.67%.结论 IgG抗-A/B ELISA检测法特异性强,精密度较高,实现了IgG抗-A/B效价检测方法由定性试验到半定量试验的转变.