脂蛋白（a）通过抑制内皮型一氧化氮合酶表达损伤内皮祖细胞

目的研究脂蛋白（a）[Lp（a）]是否通过抑制内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达损伤内皮祖细胞（EPC）。方法密度梯度离心结合差速贴壁法分离出人脐静脉血EPC,在EGM-2培养基中对EPC培养和诱导分化12天后,并用免疫荧光和流式细胞术鉴定。109个/L EPC种植于24孔培养板上,分别与0、10、25、50及100 mg/L Lp（a）孵育24 h进行作用量-效分析,然后EPC与10μmol/L ATP（eNOS激动剂）＋50 mg/L Lp（a）处理24 h,同时设对照组。MTT法检测EPC存活率,RT-PCR和Westernblot分别检测eNOS mRNA及蛋白水平。结果 Lp（a）呈剂量依赖性降低EPC的存活率,10 mg/L Lp（a）对EPC存活率的影响不显著（P〉0.05,n=3）,25 mg/L Lp（a）即表现出明显的抑制作用（P〈0.05,n=3）,以50 mg/L Lp（a）最为显著（P〈0.001,n=3）;此浓度下,EPC的eNOS mRNA和蛋白水平均显著下降;10μmol/L ATP可显著拮抗Lp（a）对EPC存活的抑制作用,同时eNOS mRNA和蛋白水平均明显上调。结论 Lp（a）损伤EPC与抑制eNOS表达有关。