-70℃超低温冻存细胞的实验研究

[目的]探索-70℃超低温条件冻存细胞的可行方法。[方法]用-70℃超低温冰箱冻存对数生长期的C6/36、BHK-21、Vero和MDCK细胞,冻存30、60和90d后,37℃水浴复苏,用MTT法测定细胞活性,计算冷冻存活率;同时观察复苏细胞形态,并与液氮冻存方法同步比较。[结果]-70℃冻存后复苏细胞均可获得90%以上的存活率,与液氮冻存细胞的复苏效果类似。光镜下显示,冻存细胞均可在拟定的冻存期内成功复苏。复苏即时镜下90%以上的细胞呈现良好的活细胞形态悬浮在培养基中。[结论]-70℃超低温冰箱冻存细胞的方法可行,尤其适用于基层或液氮来源困难地区开展细胞培养研究。