温度和二氧化碳变化对大规模培养人脐带间充质干细胞的影响

目的 探讨频繁开关培养箱引起温度和CO2浓度的变化对大规模培养脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的影响.方法 研究经产妇知情同意,取P3代脐带间充质干细胞,在37℃、5％ CO2培养条件下,模拟操作中不同的开关培养箱次数(每天0、5和10次),以及每次不同的开箱时间(1、2和3min),用单因素方差统计分析增殖数量的差异.结果 对照组细胞计数为(5.3±0.08)×106,每天开关箱5次,1、2和3min细胞计数分别为(4.5±0.14)×106、(3.9±0.08)×106和(3.27±0.19)×106,每天开箱10次,1、2和3min细胞计数分别为(3.48±0.06)× 106、(3.15±0.07)×106和(2.9±0.07)×106.同样开箱次数,随着每次开箱时间的增长细胞增殖速度减慢,1、2和3min各组细胞增殖数量差异均有统计学意义(F=265.0,P=0.000; F=1434.61,P=0.000)；同样开箱时间条件下,每天开箱10次组比5次组细胞增殖数减少,差异有统计学意义(t值为16.400,17.280,4.480,P均=0.000).随着开箱时间的延长,开箱次数增加,可以明显看到细胞胞浆内出现空泡和成片死亡脱落的细胞.结论 频繁开关培养箱及开关箱时间长短均可影响脐带MSCs的增殖,同时对细胞形态有明显影响.