蠕形螨cDNA文库的构建及鉴定

目的 构建蠕形螨cDNA文库,以便进一步研究蠕形螨相关的基因.方法 采用自然沉降法收集山羊蠕形螨,用TransZol Up试剂盒提取其总RNA,然后反转录合成第1链cDNA,通过LD-PCR获得第2链cDNA,将双链cDNA纯化去除小片段,收集大于500 bp的cDNA片段,与pGM-T载体连接,将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞TOP10建成蠕形螨cDNA文库,检验文库容量和重组效率,并采用PCR方法对插入cDNA片段大小进行分析.结果 cDNA文库的库容量为2.56×106cfu,重组效率达98％,平均插入片段长度大于1 000 bp.结论 构建的蠕形螨cDNA文库质量良好,为进一步对蠕形螨基因探索奠定基础.