传染性法氏囊病病毒凋亡调节蛋白表达细胞株的建立
Chinese Journal of Veterinary Science（2008）
摘要
构建传染性法氏囊病病毒非结构蛋白基因(NS)的重组表达质桓pEGFP-C2-NS,然后在LipofectamineTM2000介导下转染Vem细胞,活细胞状态下直接观察EGFP-NS蛋白在细胞中的表达与定位.结果显示,转染后4～5 h出现荧光蛋白表达,24 h达到高峰,呈小点样环核膜与细胞膜附近沉积,经G418筛选2-3周后稳定表达的荧光蛋白主要分布于细胞膜上.C-418抗性细胞,经RT-PCR和Western-blot验证NS mRNA及其蛋白表达,提示已建立能稳定表达EGFP-NS蛋白的细胞株,所表达蛋白具有NS和EGFP双重活性,为进一步研究NS蛋白凋亡调节机制打下了基础.
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关键词
nonstructural protein(NS),Vero cells,EGFP protein,infectious bursal disease virus(IBDV)
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