体外活化Th17细胞最适条件的研究

目的:探索体外活化Th17细胞的适宜条件。方法:检测细胞表面CD69及细胞内IL-17的表达判断Th17细胞的活化效果,比较不同浓度(25、7、150、250 ng/ml)的佛波酯(PMA),联合离子霉素和莫能霉素刺激培养外周血单个核细胞(PBMC)4～6 h Th17细胞的活化效果;另比较最佳浓度的PMA与离子霉素、莫能霉素组合和Leukocyte Activation Cocktail试剂刺激培养人PBMC 4 h Th17细胞的活化效果。结果:在25 ng/ml PMA加入离子霉素处理3 h后再加莫能霉素刺激淋巴细胞3 h后,CD4+T细胞中CD69阳性细胞含量>90%,Th17细胞比例最高且结果稳定,而Leukocyte Activation Cocktail试剂刺激后CD69阳性细胞含量为30%～80%,含IL-17的CD4+T细胞未明显增多。结论:PMA 25 ng/ml加离子霉素(1μg/ml)刺激1 h后,加莫能霉素(1.7μg/ml)刺激培养3 h,为体外活化Th17细胞的适宜条件。