多药耐药基因转染人骨髓间充质干细胞及对其化疗保护作用的实验研究

目的 探讨逆转录病毒介导多药耐药基因(mdrl)体外转染人骨髓间充质干细胞(MSCs)能否提高其对化疗药物的耐受性.方法 采用percoll密度梯度离心法自骨髓中分离MSC并进行纯化和扩增;脂质体转染法将携带有mdr1基因的逆转录病毒载体导入293T包装细胞,获得的病毒上清感染MSC,流式细胞术测定mdr1基因编码产物P-糖蛋白(P-g170)的表达水平;罗丹明(Rh123)排泌试验检测P-g170的功能活性;MTT法测定转染MSC对化疗药物耐受性.结果 mdr1基因导入骨髓MSC后稳定表达P-g170的阳性细胞百分率为33.9%,对照组为0.7%;Rh123排泌试验证实P-g170具有功能活性;转染MSC对多种化疗药物的耐受性明显强于未转染MSC.结论 mdr1基因体外转染人骨髓MSC可明显提高MSC对多种化疗药物的耐受性,为有效提高大剂量化疗在肿瘤治疗中的应用提供了有力依据.