卡那霉素对体外培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤作用

目的建立新生昆明小鼠耳蜗Corti器体外培养模型,研究卡那霉素(kanamycin,KM)对体外培养小鼠耳蜗毛细胞的损伤作用。方法分离生后3d的小鼠耳蜗基底膜,平铺在胶原凝胶表面,然后在含有1%牛血清白蛋白的DMEM/F12培养基中进行培养。采用异硫氰酸四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽荧光染色方法观察不同浓度(0.05、0.1、0.2、0.3mmol/L)KM对小鼠耳蜗毛细胞的影响,耳蜗毛细胞计数检测毛细胞缺失情况。结果不同浓度KM均可使小鼠耳蜗外毛细胞出现纤毛倒伏、排列紊乱等形态变化。KM浓度为0.05mmol/L时,耳蜗外毛细胞缺失率明显增大,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),而耳蜗内毛细胞缺失率无明显变化(P>0.05)。随着KM浓度的逐渐增高(0.1～0.3mmol/L),耳蜗内、外毛细胞缺失率亦显著增大,呈现明显的量效关系(P<0.05或P<0.01)。结论KM可对体外培养的小鼠耳蜗毛细胞产生损伤作用,内耳器官培养是研究药物耳毒性的有效方法。