重组Zonadhesin蛋白D4结构域对小鼠体外受精的影响

目的:研究Zonadhesin蛋白D4domain在受精过程中的作用。方法:将小鼠Zonadhesin D4结构域分亚结构域(VWDsubdomain及余C-端片段)克隆,在E.coli诱导表达目的蛋白,将纯化重组蛋白片段为抗原,制备兔抗鼠D4结构域多克隆抗体,免疫印迹法、精子间接免疫荧光染色鉴定多克隆抗体的特异性及D4结构域在小鼠精子表达。用多抗处理获能小鼠精子,然后与小鼠超排卵子进行体外受精及精子-透明带结合实验。结果:D4亚结构域成功克隆表达,制备了能特异性识别精子天然Zonadhesin D4的多克隆抗体,多抗处理组精子与卵透明带结合数与对照组差异无统计学意义,卵子的受精率也无明显差异。结论:抗重组Zonadhesin D4结构域的多抗对小鼠体外受精无抑制作用。