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MG-132诱导Tca-8113细胞凋亡的机制探讨

Shanghai kou qiang yi xue = Shanghai journal of stomatology(2011)

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Abstract
目的:探讨内质网应激在蛋白酶抑制剂MG-132诱导人舌鳞癌细胞株Tca-8113细胞凋亡中的作用。方法:使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基常规培养Tca-8113细胞,实验分为5组,3个实验组分别加入MG-132,终浓度为10.0、20.0、30.0μmol/L;阳性对照组加入毒胡萝卜素,终浓度为5.0μmol/L;阴性对照组加入1640培养液。培养24h后,Hoechst 33258染色法观察凋亡细胞形态学变化;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,RT-PCR检测GRP78 mRNA,Western印迹检测caspase-12蛋白的表达,ELISA法检测人泛素蛋白连接酶E3浓度。应用SPSS16.0软件包对结果进行统计学分析。结果:MG-132作用Tca-8113细胞24 h后,细胞出现典型的凋亡形态;MG-132实验组细胞凋亡率随MG-132浓度升高而逐渐升高,存在浓度依赖性;MG-132组GRP78的mRNA及caspase-12蛋白表达增强;MG-132组人泛素连接酶E3的浓度分别为28.75±2.28、18.16±0.65、8.85±0.72。结论:MG-132可通过内质网应激途径诱导Tca-8113细胞的凋亡,MG-132可抑制人泛素连接酶E3的表达。
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apoptosis,mg-132,tca-8113 cells,e3,endoplasmic reticulum stress,ubiquitin-proteasome inhibitor
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