人参发根长期冷冻保存方法的研究

本试验对人参发根长期冷冻保存方法进行了研究。首先对人参发根预培养的培养基成分进行了选择;然后通过对人参发根预培养时间、玻璃化前处理时间和玻璃化脱水时间的正交试验,确定主次因素:玻璃化脱水时间>预培养时间>玻璃化前处理时间;最后对人参发根长期冷冻保存3种具体方式进行了研究,确定了先将人参发根在预培养基上培养7d,然后经玻璃化处理90min(前处理30min+脱水90min)后,在液氮中超低温(-196℃)速冻1d,最后转移到-80℃冰箱中长期冷冻保存的有效方法,为深入开展相关研究奠定了基础。本试验还对冷冻保存前后人参发根的生长活力、总皂苷、总蛋白和总糖的含量,以及过氧化氢酶等主要生理生化指标进行了测定。利用PCR技术对冷冻保存前后人参发根T-DNA上的主要基因进行了分析,确定该冷冻保存方法对人参发根遗传稳定性无影响。