HLA-A*0201/WTl五聚体联合胞内IFNγ染色在检测白血病患者外周血WT1特异性T细胞中的应用

本研究探讨五聚体及胞内因子染色在定性定量检测抗原特异性T细胞中的应用价值.用RT-PCR方法检测受试者WTl表达水平;用HLA-A*0201/WT1五聚体及胞内IFNγ/染色检测14例表达HLA-A*0201的白血病患者全相合移植前后及其供者外周血中的、WT1特异性T细胞.结果表明:14例供者中2例有低水平WT1表达,白血病患者均有不同水平的WT1表达.14例供者均未检测到WT1+CD8+CTL和WT1+IFNγ+细胞;移植前14例患者中2例可检出WT1+CD8+CTL,3例检出、WT1+IFNγ/+细胞,二者间无明显差异(p=0.357),而移植后均可检出WT1+CD8+CTL和WT1+IFNγ+细胞,明显高于移植前(p值均<0.01).移植后大部分患者均在30天内检出WT1+CD8+CTL和WT1+IFNγ+细胞,但后者检出率高于前者(p=0.014).14例患者中WT1+CD8+CTL峰值中位数为0.18%,而WT1+ IFNγ+细胞峰值中位数为0.83%,明显高于前者(p=0.005);WT1+CD8+CTL峰值中位时间为移植后75天,WT1+IFNγ+细胞峰值中位时间为移植后105天,但二者间无明显差异(p=0.455).结论:五聚体及胞内IFNγ染色能有效检测白血病患者外周血中白血病抗原特异性T细胞;两种方法联合检测有助于抗原特异性T细胞的准确定性定量检测.