熊果酸诱导人急性白血病细胞凋亡及其作用机制

目的探讨熊果酸诱导人急性白血病细胞凋亡的作用机制。方法将0、5、10、15、20μmol/L的熊果酸作用于U937细胞6、12 h,观察量效关系。用20μmol/L熊果酸作用U937细胞1、3、6、9、12、24 h,观察时效关系。采用Annexin V/PI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡。用Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白PARP、Caspase-3、Caspase-9及Bcl-2家族基因Mcl-1、Bcl-2、Bcl-xL、Bax、Bad的表达,用β-actin做内参照。20μmol/L熊果酸作用于不同类型的急性白血病细胞(U937、Jurkat、HL60)12 h,用流式细胞仪检测细胞凋亡,并用Western blot方法检测Caspase-3、Caspase-9、PARP的表达。结果熊果酸作用于U937细胞引起细胞发生凋亡,并呈明显的量效和时效关系。Western blot结果表明,熊果酸引起凋亡蛋白酶Caspase-3、Caspase-9的降解/活化增加,促进凋亡作用底物PARP的降解增加。熊果酸还可引起抗凋亡蛋白Mcl-1的表达降低,但对Bcl-2、Bcl-xL、Bax、Bad的表达均无明显影响。结论熊果酸可诱导多种急性白血病U937、Jurkat、HL60细胞发生凋亡。Mcl-1的下调可能在熊果酸诱导急性白血病细胞凋亡中起着重要的作用,其作用机制可能为熊果酸引起Mcl-1的下调,随后引起凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的降解/活化及PARP的降解,最终促进细胞凋亡发生。