羊布鲁氏菌强毒株16M感染小鼠巨噬细胞模型的建立

巨噬细胞是机体抗吞噬能力最强的细胞,但布鲁氏菌不但不能被巨噬细胞杀死,反而能在胞内大量繁殖,因此,本研究建立其感染模型,为下一步继续研究布鲁氏菌与其宿主细胞表面相关膜蛋白之间的作用和胞内寄生机制奠定基础.用羊布鲁氏菌强毒株16M感染巨噬细胞系264.7(细胞和细菌比例为1:500),感染时间为4h,建立布鲁氏菌感染巨噬细胞模型,做间接免疫荧光试验和透射电镜试验.间接免疫荧光试验中一抗与二抗最佳稀释度分别为1:80和1:80,电镜下观察到细菌侵入细胞时膜凹陷,形态发生变化,形成内吞小体.本试验减少感染过程所涉及的环境因素,优化了间接免疫荧光试验所需的一抗和二抗浓度比,成功建立感染模型.