环磷酰胺诱导白血病细胞株凋亡及FasL、FADD基因蛋白表达

目的研究环磷酰胺(CP)诱导白血病细胞株(Jurkat)凋亡的机制,进一步探讨FasL和FADD在CP诱导白血病细胞凋亡中的作用.方法 CP刺激人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat,分别培养12、24、48 h,在相应的时间点收获细胞,碘化丙啶(PI)染色细胞DNA,流式细胞术(FCM)检测DNA片段的亚二倍体峰(subG1)阳性的凋亡细胞;并用Western Blot技术测定FasL和FADD的表达.结果 CP 3 mg/L刺激Jurkat白血病细胞12 h几乎未见细胞凋亡(P＞0.05),在24 h也只有26.40%的细胞出现凋亡;但随着时间的延长,CP诱导细胞凋亡明显增加,到48 h则有74.95%的细胞发生凋亡(P＜0.01).CP也上调FasL和FADD的表达,并随CP刺激细胞时间的延长其表达量也逐渐增加.结论CP诱导白血病细胞株Jurkat凋亡的起效时间较晚,诱导细胞DNA片段形成,上调FasL和FADD的表达,表明CP诱导白血病细胞凋亡依赖于Fas/FasL通路.