缺氧环境下核转录因子Sp1在体外培养的人视网膜色素上皮细胞中的表达

目的研究缺氧对体外培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞中核转录因子Sp1表达的影响。方法将体外培养的人RPE细胞置于含终浓度为200μmol.L-1CoCl2的培养液中培养以建立RPE细胞化学缺氧模型。在缺氧后即刻(即常氧状态下)、2h、4h、8h、12h和24h终止缺氧,用细胞免疫荧光和Western blotting分别检测RPE细胞中核转录因子Sp1蛋白表达部位和量的动态变化;RT-PCR检测RPE细胞中Sp1mRNA表达量的动态变化。结果缺氧后即刻(即常氧状态下)Sp1蛋白荧光主要分布于RPE细胞质内;随缺氧时间延长,细胞质内绿色荧光强度减弱,细胞核荧光强度明显增强,至缺氧后12h,细胞核荧光强度达到最高水平。随着缺氧时间延长,RPE细胞内Sp1mRNA和蛋白水平逐渐增高,至12h达峰值,24h表达已降低,但仍高于常氧状态。结论缺氧早期可使RPE细胞内Sp1的表达水平增高,并促使其蛋白从细胞质向细胞核内转移,提示Sp1可能在视网膜脉络膜缺血缺氧性疾病的发生中起着一定作用。