甲氨蝶呤联合4-氢过氧环磷酰胺对干燥综合征患者单个核细胞的作用
Chinese Journal of Allergy and Clinical Immunology(2011)
Abstract
目的研究甲氨蝶呤(MTX)联合4-氢过氧环磷酰胺(4HC)对体外培养的干燥综合征(SS)患者外周血单个核细胞(PBMC)的周期、凋亡及分泌白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法 MTX、4HC、MTX联合4HC的3组药物在4个浓度水平0、1、10、100μg/ml,与体外培养的SS患者PBMC作用48h。用流式细胞术(FCM)检测细胞周期、凋亡,用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测IL-1β、TNF-α分泌水平。对MTX、4HC在0、1、10μg/ml浓度水平进行析因设计。结果细胞周期:与对照组相比,MTX10组、MTX100组PBMC的G0/G1期比例增加,S期及G2/M期比例减少;不同药物浓度4HC组对细胞各周期影响多数无统计学意义;联合组中MTX1+4HC1组、MTX10+4HC10组及MTX100+4HC100组G0/G1期细胞比例减少,S期及G2/M期比例增加。细胞凋亡:MTX10组、MTX100组、4HC10组、4HC100组和联合组PBMC凋亡率高于对照组。同一药物浓度水平时,MTX1+4HC1组凋亡率高于MTX1组,MTX10+4HC10组凋亡率高于MTX10组及4HC10组,MTX100+4HC100组凋亡率高于MTX100组及4HC100组。细胞因子:不同药物浓度的MTX组、4HC组和联合组IL-1β分泌水平均低于对照组;除MTX10外,各药物组TNF-α分泌水平均低于对照组。比较同一药物浓度水平时,不同组的IL-1β、TNF-α分泌水平,混合组均低于单用药组。交互作用:MTX联合4HC在0、1、10μg/ml3个浓度对G0/G1期比例、凋亡率、IL-1β及TNF-α分泌水平4个方面的F值分别为:4.68、45.19、4.44及3.392,P值均<0.05,提示MTX和4HC存在交互作用。结论 MTX和4HC联合作用具有协同效应。MTX和4HC联合作用于体外培养的SS患者的PBMC,可有效抑制其G0/G1期的细胞凋亡,降低促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌水平。
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Key words
apoptosis,interleukin-1β,4-Hydroperoxycyclophosphamide,tumor necrosis factor-α,methotrexate,cell cycle,Sjgren syndrome
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