一种高效FITC标记LPS方法的建立及应用

目的探索一种高效的荧光素示踪内毒素(lipopolysaccharide,LPS)的方法。方法将LPS解聚为单体后,加入表面活性剂,在37℃中性溶液中用FITC标记LPS18h,通过分子截留技术将小分子游离的FITC及其他杂质从FITC-LPS中除去,并用荧光分光光度计分别测定标记反应液和纯化后的FITC-LPS溶液的荧光值,将两者进行比较,测定荧光标记率。结果本方法标记的FITC-LPS在激光共聚焦显微镜下能进行良好示踪。经荧光分光光度计检测其标记率为LPS∶FITC=1∶33.13(物质的量比值)。结论利用表面活性剂与超滤纯化相结合对LPS进行FITC标记的方法较传统方法效率高,操作简单可靠,为医药学实验中示踪LPS提供了一条有效的途径。