H5N1重组禽流感病毒样颗粒免疫原性研究

目的 对构建的H5N1重组禽流感病毒样颗粒(VLPs)进行初步免疫原性探讨,并与H5N1全病毒灭活疫苗(WIV)进行体液免疫和细胞免疫的比较.方法 在0周和3周分别以纯化H5N1重组禽流感病毒样颗粒、H5N1全病毒灭活疫苗及pH7.2 PBS腿部肌肉注射BALB/c小鼠,于不同时间收集血清,以血凝抑制试验(HI)和血清IgG抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)评估体液免疫,CD4+、CD8+T细胞亚群及酶联免疫斑点试验(ELISPOT)评估细胞免疫,并以同型毒株滴鼻攻击,观察小鼠存活率.结果 病毒样颗粒各组和全病毒灭活疫苗免疫后小鼠血清ELISAIgG效价均有升高；中和抗体效价除病毒样颗粒120 ng/只免疫剂量外其他免疫小鼠HI效价均达1∶40;小鼠脾CD4+T淋巴细胞亚群分类:全病毒灭活疫苗组(600μg/只)为36.56％；病毒样颗粒组(120 ng/只,600 ng/只,2500 ng/只)分别为26.58％,32.20％,29.25％;PBS组为26.65％；CD8+T淋巴细胞亚群分类:全病毒灭活疫苗组(600 ng/只)为10.78％；病毒样颗粒组(120 ng/只,600 ng/只,2 500 ng/只)分别为13.53％,14.24％,13.35％；PBS组为10.69％.ELISPOT试验统计学数据显示,病毒样颗粒和全病毒灭活疫苗的小鼠脾单个核细胞分泌IFN-γ细胞与PBS组有显著性差异；小鼠保护性试验结果显示,除病毒样颗粒120 ng/只免疫剂量小鼠的存活率为87.5％外,其他病毒样颗粒实验组小鼠均为100％,PBS对照组为12.5％.结论 H5N1重组禽流感病毒样颗粒能诱导体液免疫和细胞免疫,并能抵御同型病毒株的攻击,可作为H5N1人用禽流感的候选疫苗.