连续热裂解法大规模提取质粒DNA
Journal of Agricultural Biotechnology(2006)
摘要
选择质粒保有率高及最适合发酵的TOP10菌株,在传统的煮沸裂解法提取质粒的基础上进行了提取方法的改进,使用恒流泵和热交换螺旋管,使菌体在流动过程中完成热裂解,释放质粒DNA。改进后的方法裂解温度可降到70",提取工艺流程简单,缩短了提取时间,提高了质粒DNA的提取效率。利用本方法提取的质粒大小正确、纯度合格,每升发酵液得率平均为100mg质粒DNA。
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关键词
thermal lysis,plasmid DNA,flow-through
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