霍乱弧菌菌体蛋白双向电泳技术的建立

目的建立霍乱弧菌全菌体蛋白的双向电泳技术,获得分辨度高、重复性好的双向电泳图谱。方法利用适当的裂解液处理霍乱弧菌,提取全菌蛋白;采用pH梯度等电聚焦对全菌蛋白进行双向电泳;考马斯亮蓝染色后获得的双向电泳图谱,并利用ImageMaster 2D Elite5.0图象分析软件进行分析,所得的数据用SPSS15.0进行统计分析。结果得到了(1081±16)个蛋白斑点,蛋白主要集中在pI4.24～7.20之间,重复胶的匹配点数为(1057±28),匹配率为97.85%。结论建立了霍乱弧菌全菌双向电泳分析方法,2-DE图谱中蛋白位点的分辨率和重复性非常高,获得了较为理想、清晰的双向电泳图谱,为进一步研究其蛋白质组学奠定了基础。