冻存对脐血树突状细胞介导的食管癌疫苗的影响

目的:观察低温冻存对人脐血DC与EC109食管癌细胞融合疫苗生物学特性及CTL活性的影响。方法:应用免疫磁珠标记法分选人脐血CD34+干细胞,细胞因子扩增培养为成熟DC,聚二乙醇(PEG)融合法制备EC109-DC融合疫苗,-80℃低温冰箱冻存,3周后复苏,计算疫苗回收率及存活率。倒置相差显微镜观察冻存后疫苗的细胞形态,流式细胞术分析疫苗及疫苗活化后T淋巴细胞的表型,MTT法检测疫苗特异的CTL活性。结果:冻存后疫苗存活率及回收率分别为(77·2±1·8)%、(61·8±1·4)%。冻存对疫苗细胞形态及表型无明显影响。冻存疫苗和未冻存疫苗活化后T淋巴细胞,CD3+T/CD4+T及CD3+T/CD8+T均较活化前明显增加,P=0·002;CD4+T/CD8+T由活化前的0·85分别增加至1·25和1·29,疫苗冻存与否对T细胞活化能力无明显差别,P=0·052。疫苗特异的CTL活性未受冻存明显影响,其杀伤率与未冻存疫苗组相比差异无统计学意义,P=0·667。结论:-80℃低温冰箱短期冻存对EC109-DC融合疫苗生物学特性及特异的CTL活性无明显影响,可望为EC109-DC疫苗的开发应用提供简单可行的保存方法。