RP-HPLC测定胰岛素龙血竭纳米颗粒中胰岛素的含量

目的:建立反相高效液相色潜(RP-HPLC)法测定胰岛素龙血竭纳米颗粒(ISDN)中胰岛素的含量。方法:ISDN 先用80%的乙醇水溶液(pH 3.0)溶解制样,样品的检测采用 Phenomenex C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:0.1 mol·L~(-1)磷酸二氢钠溶液(以磷酸调 pH 为3.0)-乙睛,梯度洗脱(0～15 min,比例为72:28;16～40 min,比例由72:28→30:70),流速为1.0 mL·min~(-1);检测波长为210 nm,柱温为30℃。结果:胰岛素在5～200μg·mL~(-1)范围内,峰面积与浓度呈良好线性关系(r=0.9999);高、中、低3种浓度水平的回收率(n=3)分别为99.6%,98.9%,98.7%,RSD 分别为0.3%,0.8%,0.4%;日内、日间精密度的 RSD 分别为0.2%,0.5%,0.5%和0.4%,1.0%,1.2%。结论:该方法样品处理过程简单,分离效果和重复性均良好,结果准确可靠,可用于该制剂中胰岛素含量的检测,同时也为龙血竭包裹其他蛋白质类药物的分析提供了可靠依据。