树突状细胞体外扩增小鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞的研究

目的探讨利用小鼠同种异型骨髓源性树突状细胞(BMDC)与CD4+T细胞共培养体外扩增CD4+CD25+调节性T(CD4+CD25+Treg)细胞的方法。方法将小鼠同种异型imBMDC与CD4+T细胞共培养,通过测定细胞增殖率和CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞比例的变化评定该方法体外扩增CD4+CD25+Treg细胞的能力;利用荧光定量RTPCR检测体外扩增CD4+CD25+Treg细胞FOXP3基因表达及细胞增殖抑制实验检测其细胞功能活性。结果共培养d 7细胞增殖率(5.26±0.286)倍;CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的(33.77±3.69)%,较新鲜分离小鼠脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞比例明显增加(P﹤0.05)。体外扩增CD4+CD25+Treg细胞FOXP3基因的表达与新鲜分离CD4+CD25+Treg细胞差异无统计学意义(P﹥0.05)。混合淋巴细胞培养证实体外扩增CD4+CD25+Treg细胞的细胞增殖抑制作用较新鲜分离的CD4+CD25+Treg细胞更强(P﹤0.05)。结论小鼠同种异型BMDC与CD4+T细胞共培养能有效诱导扩增CD4+CD25+Treg细胞并保持其免疫细胞功能活性。