马克斯克鲁维酵母β-半乳糖苷酶合成条件的优化及其酶学性质表征

β-半乳糖苷酶是广泛使用的食品添加剂,主要用于降解乳制品中的乳糖,缓解乳糖不耐受症状.该研究对实验室保藏菌株马克斯克鲁维酵母的发酵条件进行了优化.在20 g/L半乳糖、20 g/L玉米浆干粉、40 ℃、初始pH 6.5、150 r/min的条件下,粗酶液的酶活力为26.3 U/mL,表明该菌株具有利用廉价碳氮源高效生产β-半乳糖苷酶的潜力.通过DEAE阴离子交换层析进一步纯化得到比活力为124.09 U/mg的纯化酶.纯化后酶的最适温度40 ℃,最适pH 6,Km为5.28 mmol/L,kcat为4.74s-1.此外,发现该酶受Mg2+的促进,在20～40 ℃表现出优异的热稳定性,40 ℃下30 min仍能保持95.6％的活力.因此,马克斯克鲁维酵母β-半乳糖苷酶比乳酸克鲁维酵母的热稳定性更好,具有潜在的工业应用潜力.