反相高效液相色谱法测定隐球菌性脑膜炎患者脑脊液中两性霉素B的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定人脑脊液中两性霉素B,并用于隐球菌性脑膜炎患者脑脊液样品的测定。方法:采用Agilent C18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为0.005 mol.L-1乙二胺四乙酸二钠-甲醇(21∶79),流速1.0 mL.min-1,检测波长380 nm,室温下进样20μL。结果:由于患者脑脊液中药物的含量测定范围较大,故采用2个浓度线性范围:1.25～30μg.mL-1(r=0.9999),高、中、低3种浓度的平均回收率为94.9%,日内RSD≤1.38%,日间RSD≤2.67%;0.11～5μg.mL-1(r=0.9999),高、中、低3种浓度的平均回收率为93.1%,日内RSD≤1.73%,日间RSD≤4.09%。结论:本法灵敏度高,重现性好,专属性强,可用于椎管内持续给予两性霉素B的临床药代动力学研究及脑脊液中该药物浓度的临床检测。