分子模拟和光谱法研究华法林与人血清白蛋白的结合机制

华法林(WF)是临床常用口服抗凝药物,有关它与人血清白蛋白(HSA)结合位点处的热点残基、作用力类型以及对HSA构象影响报道较少.通过在模拟人体生理条件下,利用分子模拟、内源荧光光谱、三维荧光光谱和同步荧光光谱,研究了WF与HSA之间作用机理.WF能使HSA构象发生改变,导致Tyr残基微环境极性降低、Trp残基周围亲水性增强.WF能有效猝灭HSA内源荧光,猝灭机制属静态猝灭,通过Lineweaver-Burk方程求得两者间结合常数(K,)为3.55x10s L/mol(310 K)、结合位点数(n)约为1.Van^t Hoff定律计算得到的热力学参数(AH = 169.56 kJ/mol和AS = 653.23 J/(mol·K)),说明WF与HSA之间的主要作用力为疏水作用力.根据Forster's能量转移定律确定,WF与HSA结合距离为2.87 nmoWF通过氢键和疏水作用力与HSA的亚域IIA中氨基酸残基进行作用,WF周围4.0 A区域还存在I B、IIB、fA亚结构域的30个氨基酸残基.